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Caspase-3的介绍
1、caspase-3的原结构域明显短于ICE，但蛋白酶活性中心和与结合底物有关的保守的氨基酸均与ICE一致。
2、caspases是一组存在于细胞质中具有类似结构的蛋白酶。它们的活性位点均包含半胱氨酸残基，能够特异性切割靶蛋白天冬氨酸残基后的肽键。因此caspases意为“天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶”。
3、caspase-3可以被多种因素活化，在CTL细胞的杀伤作用中，它既可被Fas/FasL途径活化，也可以通过颗粒酶B途径活化。
Caspase-3的caspase-3的结构
1、caspase-3最主要的底物是多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP(poly(ADP-ribose) polymerase)，该酶与DNA修复、基因完整性监护有关。
2、现在一般认为caspase-3是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶，也是CTL细胞杀伤机制的重要组成部分。
3、Caspase以酶原形式存在于正常细胞中，细胞凋亡启动后被激活。
4、Caspase-3型割开 半胱天冬酶半胱天冬酶（Caspase）分子是一类在进化上非常保守的蛋白酶类分子。该酶有多种亚型结构，其中最常见的是Caspase-2。
caspase3和caspase8是促凋亡基因还是抗凋亡基因
1、caspase3和caspase8是促凋亡基因还是抗凋亡基因 有人预测，在不远的将来，可能会产生一种分析单个DNA分子的测序技术。到那时，一个人的基因组全序列可能在一天内就被测出，而费用不会超过1万美元。
2、caspases负责选择性地切割某些蛋白质，切割的结果是使靶蛋白活化或失活，而非完全降解。
3、随后，其他学者独立地将这一蛋白基因克隆出来，并分别命名为prICE、apopain(凋亡素)和Yama(印度传说中的死亡之神)。1996年这种蛋白酶被命名为caspase-3。
4、Caspase-8反应是一种酶促反应，属于细胞凋亡（程序性细胞死亡）的调控机制之一。它是细胞凋亡信号通路（死亡受体信号通路）中的一环。
请教有关caspase-3的有关问题
1、有活性的Caspase-3的蛋白长度与未激活状态的Caspase-3是不同的。未激活的Caspase-3是通常所说的proCaspase-3，它在激活后产生有活性的Caspase-3。具体有相关文献可以查阅。因此你做的引物应该是不一样的。
2、caspase-3最主要的底物是多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP(poly(ADP-ribose) polymerase)，该酶与DNA修复、基因完整性监护有关。
3、并分别命名为prICE、apopain(凋亡素)和Yama(印度传说中的死亡之神)。1996年这种蛋白酶被命名为caspase-3。现在一般认为caspase-3是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶，也是CTL细胞杀伤机制的重要组成部分。
4、caspase-3的原结构域明显短于ICE，但蛋白酶活性中心和与结合底物有关的保守的氨基酸均与ICE一致。
如何进行Caspase-3活性的流式细胞术检测
1、随着细胞的增殖，CFSE不断被稀释，使用流式细胞仪对CFSE进行检测，可以对细胞的增殖进行分析。 免疫组化检测 技术原理： 使用免疫组化的方法对细胞增殖相关抗原-Ki-6PCNA进行检测。
2、用流式检测细胞凋亡的方法很多种，有些需要固定，有些不能固定的。根据方法而定，不能一概而言。如果是测细胞内抗原的，比如抗体识别活化caspase-3， 那就要固定。其他检测功能的，比如caspas3-3活性的，就要活细胞来测试。
3、细胞功能分析：通过与特定的功能标记物结合，可以对细胞的功能状态进行分析，如活性细胞检测、细胞内钙离子水平分析、细胞吞噬作用检测等。
4、流式细胞术检测细胞凋亡的方法也有很多，其中最重要是annexinV/PI双染色法。其他的还有SYTO/PI双染色法、细胞DNA含量分析法、线粒体损伤检测法、活化的caspase-3检测法、FLICA标记法、甲酰胺诱导ssDNA单抗检测法、TUNEL法等。
小伙伴们，上文介绍南京建成caspase3试剂盒的内容，你了解清楚吗？希望对你有所帮助，任何问题可以给我留言，让我们下期再见吧。
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