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分子克隆知识
胶染料作用：对核酸进行染色，使核酸分子在紫外光照射下能够被检测到。上样缓冲液： ①溴酚蓝：可以指示电泳进度，当溴酚蓝染料移动到距离凝胶前沿1~2cm处停止电泳；②甘油、蔗糖：增加样品密度，使样品沉入胶孔。
同源重组构建质粒原理是广泛应用的一种分子克隆技术。
于是，有人就把这类操作称作克隆，即将clone一词由名词转化成动词，并将核移植称为 nuclear cloning(核克隆)，通过基因工程得到DNA分子的无性系称为molecular cloning(分子克隆)。
克隆，是Clone的译音，意为无性繁殖，克隆技术即无性繁殖技术。前不久报道的英国罗斯林研究所试验成功的克隆羊多利，是首次利用体细胞克隆成功的，它在生物工程史上揭开了新的一页。
三是对医疗保健工作产生重大影响，如依靠分子克隆技术，搞清致病基因，提出疾病产生的分子生物学机制；为器官移植寻求更广泛的来源，将人的器官组织和免疫系统的基因导入动物体内，长出所需要的人体器官，可降低免疫排斥反应，提高移植成功率。
由于学识浅薄，未免有疏漏不足之处，但我希望以此来唤醒那些为克隆人研究摇旗呐喊的“无知”知识分子的灵魂，望广大法律界同行为此深思，为此与我共同做出抵制克隆人研究的有益努力。
粪便基因组提取
研磨 ， 取研磨后的粪便约 200mg 提取 DNA 。 加入 200μL 裂解液Ⅰ，悬浮沉淀，37℃放置 30 分钟。 加入 200 μL 裂解液Ⅱ， 20μL 消化液，充分振荡混匀，56℃水浴 10 分钟。
提取粪便DNA可以直接用粪便DNA提取试剂盒，使用步骤：使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
数量微少，所以要提取人正常DNA就相当容易了，只要几克粪便就可完成。有痔疮等内出血就更容易了，会增加粪便中人基因组的量。至于说道的其他DNA的干扰等情况，目前的技术完全可以剔除掉，得到完整的人类基因组信息。
想从粪便中提取DNA，首先应该先把粪便处理一下的。一般常用10%的赛氏液处理，于粪便中加入赛氏液，3000rpm离心15－20min，取上清液即可用于其他操作，按着protocol提取RNA和DNA都没有问题的。
已知部分基因序列,如何获得全长基因?
用已知的基因保守序列，设计引物试试；一般来说相同物种相同基因的相似性还是比较高的。当然，可以适当调节扩增程序，比如降低退火温度，这时就是引物配对差点儿，还是可以扩增出来的，可以低到30°C。
一般情况下identity100％）就是含有这个基因的生物了。然后根据已知序列的两端序列设计上下游引物让生物公司去合成，拿到引物后，提取该生物的基因组DNA做模板，利用上下游引物做PCR，再对PCR产物进行TA克隆就可以了。
生物信息学方法查找相关物种中的这一转录本的序列，然后根据保守序列设计兼并引物。提取转录这种转录本的细胞中的RNA，在利用引物扩增出CDNA。这样就获得了这样转录本的全长。
这是NCBI的网站，然后在serch中输入你的基因序列号，即可以得到。下载到序列（就是复制和黏贴的过程），然后可以对这断序列进行编辑了。我一般用的DNAstar，我已经上传了附件。
要寻找一个基因的全长同源序列在其他物种中，你可以使用生物信息学工具和数据库进行比对和搜索。
从cDNA文库所得到的许多EST序列集合组成数据库，代表在一定的发育时期或特定的环境条件下，特定的组织细胞基因表达的序列。
各位小伙伴们，我刚刚为大家分享了有关tailpcr试剂盒的知识，希望对你们有所帮助。如果您还有其他相关问题需要解决，欢迎随时提出哦！
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