质粒提取试剂盒价格-上海生物商贸有限公司

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植物基因工程实验技术-提取质粒

质粒DNA的提取方法主要有碱裂解法、煮沸法、酚氯仿裂解法，该试剂盒使用的是碱裂解法（说明书 http：// ）。

在DNA重组中，质粒或经过改造后的质粒载体可通过连接外源基因构成重组体。从宿主细胞中提取质粒DNA，是DNA重组技术中最基础的实验技能。分离质粒DNA有三个步骤：培养细菌使质粒扩增，收集和裂解细菌，分离和纯化质粒DNA。

质粒抽提方法即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。

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3、菌体未活化，生长效率低，菌量少。需要活化菌种。属于低拷贝质粒，增加菌液的量。 SolutionB裂解不充分，室温静置5min。最后洗脱体积不够，洗脱液不少于50L。

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第一次使用时，将试剂盒所带的全部RNase A加入溶液P1后（终浓度100ug/ml）置于2-8℃保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA残留，在溶液P1中补加RNase A即可。

各公司的质粒提取试剂盒大同小异，你这个说明书可能是宝生物的试剂盒。

1、用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒DNA。琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。

2、和菌的生长状况有关，提取时的温度有关要低温，还需要加溶液，操作的时候要温和。对数期菌的生长状况和数量最佳，有利于提取质粒。

3、反复冻融115次和21次后，以冻融后的质粒标准品为模板同时进行real-time PCR扩增定量，比较量值变化。

4、质粒提取是指去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。目录质粒提取原理质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA，是进行DNA重组的常用载体。

5、大提用于大量菌液的提取，100ml-500ml 均可，而小提用的菌液量很少，一般5-5ml。

6、通过离心沉淀，细胞破碎、染色体DNA及大部分蛋白质等可被出去，而质粒DNA及相对分子质量较小的RNA仍为可溶状态。混杂的RNA可用RNA酶消除，再用酚／氯仿处理，可除去残留蛋白质。

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