哈喽！相信很多朋友都对tunel试剂盒配置不太了解吧，所以小编今天就进行详细解释，还有几点拓展内容，希望能给你一定的启发，让我们现在开始吧！
求助石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色 曾经作过脑组织的TUNEL，也指导过别人做心肌的TUNEL，谈谈我的意见：蛋白酶K37度30min，好像有点偏长，我是10min。
) 通过用二甲苯终洗2 次的系列乙醇使切片脱水。 用Permount 或Entallan介质固定，用光学显微镜分析 注意事项 TUNEL 阳性核被染成深棕色。如需要，在DAB 反应中可加人硫酸镍(3 mg/ml) 。
参考见解：最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照，看是否非特异性染色。(1)空白对照：如果你做的是石蜡切片免疫组化，这个对照必须有，目的是看自发荧光，脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
细胞爬片取出后，PBS洗2遍。但比如做凋亡的TUNEL染色时就避免洗，因为凋亡的 细胞在洗的过程中有可能会脱落。常用的固定液 ）冷丙酮，可用于一般的免疫组化染色。
不好染。染色原理是运用一些物理和化学的知识。染发剂作用于头发的时候洗干净之后会有一些小分子进入头发的内部，使其产生颜色。
一抗种属不同的情况下，免疫荧光双标两种一抗可以一起加：容易起交叉反应的是二抗，因为二抗会对IGG有反应。而一抗是针对特异蛋白表位的。并不是针对IGG的。
怎么更好的研究细胞凋亡?
1、通过细胞增殖与细胞凋亡共同调节成体的组织器官稳态的维持。
2、消化细胞 ，将细胞悬液接至内含盖玻片的培养皿中。CO2培养箱中培养48小时，使细胞长在盖片上。
3、鉴别方法：由于染色质DNA的有控裂解是由内源性内切核酸酶切割的，并且切割的DNA片段大小有规律，都为200bp的倍数，因此，抽提其中的DNA进行琼脂糖凝胶电泳，呈现梯状就可以得知发生了程序性死亡，即细胞凋亡。
4、方法很多，给你推荐一个比较新的，单细胞 凝胶电泳 ，也叫 彗星实验 优点是该法检测具有高灵敏性，研究的细胞不需处于 有丝分裂 期。同时，这种技术只需要少量细胞。
5、检测细胞凋亡的方法很多，如电子显微镜或者光学显微镜下的形态学观察、细胞DNA提取物的DNA梯状带电泳实验等。而流式细胞术是非常重要的检测细胞凋亡的方法，不仅可以定性，也可以定量。
6、丫啶橙(AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。
细胞凋亡的免疫学检测方法有哪几种(注意是免疫学的方法)
HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有出芽现象。丫啶橙染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。
而流式细胞术是非常重要的检测细胞凋亡的方法，不仅可以定性，也可以定量。流式细胞术检测细胞凋亡的方法也有很多，其中最重要是annexinV/PI双染色法。
流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine， PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的（如下图3）。
细胞凋亡的检测
) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测：PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生，可能作为免疫系统的识别标志。
细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。
是一种分子量为35-36KD的Ca2+的依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。因此将Annexin-V进行荧光素（如FITC 、PE）或生物素（biotin）标记，以标记了的膜联蛋白-V作为探针，利用荧光显微镜检测细胞凋亡的发生。
细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。 细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。
) PS(磷脂酰丝氨酸）在细胞外膜上的检测2）细胞内氧化还原状态改变的检测3）细胞色素C的定位检测4) 线粒体膜电位变化的检测 细胞凋亡晚期中，核酸内切酶在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。
下图是用annexinV/PI双染色法检测细胞凋亡得到的一张散点图。
有无好用的TUNEL细胞凋亡分析试剂盒推荐?
Abbkine TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒 (橙红荧光)利用脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）将脱氧核糖核苷酸-荧光素偶联物标记到DNA缺口的3-末端。
Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒 产品说明：凋亡是一种程序性的细胞死亡，与细胞的坏死有生化和形态等方面的不同。
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色(Propidium staining，即PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。
有关Annexin -PI凋亡细胞的检测使用的是BIODAI的较多，具体的步骤如下：1) 悬浮细胞：300g，4℃，离心5min，收集细胞。贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化后，300g，4℃，离心5min，收集细胞。
细胞凋亡在个体发育和组织稳态的维持中具有重要的作用：如蝌蚪尾巴退化涉及细胞凋亡。
辛伐他汀裸鼠体内诱导K562细胞凋亡的分子机制
结果： 不同剂量的辛伐他汀能够诱导*鼠体内K562细胞凋亡，并随剂量的增加凋亡率逐渐增高(P0.01)；不同剂量的辛伐他汀能够引起n ras， pi3k， akt1， nf κb1 mRNA的表达差异(P0.01)。
Annexin-V和细胞周期。结果随药物浓度升高，K562细胞向红系分化明显，ATM基因表达量增强而ATR基因表达量降低，Bcl-2水平下降，细胞凋亡显著，亚二倍体和G1期细胞数增多，S期和G2/M期细胞减少。
同时松茸多糖还能够诱导K562细胞凋亡，抑制白细胞增殖；研究还表明肝癌患者在肝癌切除后服用松茸.能够明显提高存活率，并且可使GOT，r-GTP，胆红素值明显降低。
以上内容就是解答有关tunel试剂盒配置的详细内容了，我相信这篇文章可以为您解决一些疑惑，有任何问题欢迎留言反馈，谢谢阅读。
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