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caspase在细胞凋亡中起什么作用?
1、凋亡起始者（caspase 2，8和10）的活化属于同性活化（Homo activation）。
2、除此之外，Caspase还能灭活或下调与DNA修复有关的酶、mRNA剪切蛋白和DNA交联蛋白。由于DNA的作用，这些蛋白功能被抑制，使细胞的增殖与复制受阻并发生凋亡。
3、自由基可损伤细胞及细胞器膜、线粒体、DNA，激活核酸内切酶和半胱氨天冬蛋白酶（caspase），因而促进细胞凋亡已有诸多报道。MODS 过程中的各阶段都有过量氧自由基产生。
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怎样鉴定细胞凋亡
1、根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1 光学显微镜和倒置显微镜 (1) 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。
2、光学显微镜和倒置显微镜（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。
3、主要特征是：细胞变圆，染色质凝聚、分块，胞质皱缩。之后整个细胞通过发芽、起泡等方式形成一些球形的突起，并在其基部绞断而脱落形成大小不等的内含胞质、细胞器及核碎片的凋亡小体，然后被周围细胞所吞噬。
4、，形态观察 坏死细胞：细胞膨胀，细胞质膜裂解，细胞器膨大，溶酶体破裂，水解酶释放到细胞溶质中使细胞内溶物分解导致细胞崩解，DNA随机断裂成不规则碎片，引起炎症。
5、所以可以用FITC偶联的annexinV鉴别凋亡细胞和活细胞。坏死细胞的PS也会从细胞膜的内表面翻转到细胞膜的外表面，annexinV也能识别坏死细胞表面的PS，所以 annexinV无法区分坏死细胞和凋亡细胞 。
6、) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测：PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生，可能作为免疫系统的识别标志。
凋亡细胞的原位组织末端转移酶组织切片经水化后标记
细胞经处理后，采用常规方法分离提纯DNA，进行琼脂糖凝胶和溴化乙啶染色，在凋亡细胞群中可观察到典型的DNA ladder。
细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。
病理性色素沉着 细胞内外有色物质的蓄积 含铁血黄素，脂褐素，黑色素 心衰细胞，心肌褐色萎缩，皮肤基底层 病理性钙化 骨和牙齿外的软组织内固态钙盐的蓄积 营养不良性/转移性 坏死、出血、血栓、粥样斑块的钙化。
(二)原位末端标记技术 细胞凋亡时核酸内切酶激活而切割DNA使之单链断裂。
因此将Annexin-V与PI匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。
求助检测细胞凋亡的最佳方法
收集约106细胞，用冷PBS洗2次。4%福尔马林4℃固定10min左右后涂片，晾干。以5-10μg/mL hocchst 33258染色5-10min，水冲净，晾干后观察，以紫外光（340nm）激发hocchest。
所以 annexinV和PI同时使用，就可以区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞 ，这就是annexinV/PI双染色法检测细胞凋亡的原理。标记方法与常规标记荧光抗体的方能一样：加入适量的FITCannexinV和PI，4℃静置30min即可。
细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。
细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。 细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。
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