哈喽！相信很多朋友都对pcr扩增中试剂不太了解吧，所以小编今天就进行详细解释，还有几点拓展内容，希望能给你一定的启发，让我们现在开始吧！
1用PCR仪扩增细胞的DNA,所用的试剂和样品是什么?其循环条件是什么...
pcr扩增步骤：1．细菌染色体DNA的提取（见上一组）2．RAPD反应体系的配置（上图）3·反应程序：将RAPD反应试剂加入EP管中 轻混后用100ul石蜡油覆盖于反应混合液之上，防止样品在反复加热-冷却的过程中蒸发，盖好盖子。
PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置： 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。
PCR反应进行的条件：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。
PCR即聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）的缩写，它是体外酶促合成特异DNA片段的方法。
PCR产物的电泳检测时间：一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚至消失。
这使得PCR技术在一段时间内没能引起生物医学界的足够重视。1988年初，Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR，其扩增的DNA片段很均一，真实性也较高，只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次，仍需加入新酶。
pcr扩增为什么要将相同的试剂混匀
PCR扩增属于酶促反应，所以，DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。
PCR混匀标本很重要。是为了使其可以充分反应。
缓冲液：缓冲液一般不容易出问题，只是使用前需要彻底融化混匀使用。温度：变性和退火温度是主要需要考虑的。模板：PCR 的关键之一，模板不是越多越好。
加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。
DNA含量即增加一倍。如图所示：现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。
PCR实验都需要什么试剂啊?
PCR (聚合酶链式反应)是一种以DNA为模板的核酸检测技术，不仅需要DNA模板和特异性引物，还需要聚合酶、脱氧核苷酸三磷酸(dNTPs)等有机试剂参与反应。
参加PCR反应的物质主要有五种即：引物、酶、dNTP、模板和缓冲液。引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。
需要1 缓冲液（分为含二价Mg和不含的，不含的就还要MgCl2）2 dNTP 3 引物 4 模板 5 酶 如果你买MIX的话，就只需要MIX，模板以及引物。
荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
需要购买的 做pcr扩增用的试剂： PCRmix，或者酶，dntp等，电泳的试剂：胶，buffer，核酸染料，marker。如果做荧光定量或者测序，需要荧光修饰的引物，还得合成。耗材：pcr板，吸头，pcr管。还有很多别的东西。
PCR仪，200ul的离心管，DNA聚合酶，引物，BUFFER，去离子水，镁离子，模板，加样枪等等。
扩增试剂数值是什么
固定的反应试剂：比如buffer，dNTP，酶的用量一般都是固定的，按照protocol给出的要求加。关键是模板和引物的量。
扩增效率理论上不可能超过2。计算值超过2，可能是因为pcr效率不高或者不稳定，结果线性度差，导致某个区间的数据点计算出来的扩增效率反而大于这样的标准曲线如果作图的话，数据点都不在一条直线上。
生物化学中用的试剂，标 N× 就是说用的时候要在体系中稀释到N倍体积，比如 10× PCR buffer 就是每 50μL体系总体积中添加 5μL 即可。
乙肝乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸扩增定量（HBV-DNA）是一种检测乙肝病毒在血液中的数量和复制活性的实验方法。根据不同的实验室和试剂，HBV-DNA的正常值和检测范围可能有所不同。
试剂（1）引物：决定扩增的特异性。根据检测的DNA不同，选用不同引物，每种病原微生物都有自己特异的引物。（2）耐热的DNA聚合酶：此酶是从耐热细菌中分离出来的，能耐受高温90℃-100℃。
我想问做PCR扩增应该注意的事项?
1、(1)戴一次性手套，若不小心溅上反应液，立即更换手套。(2)使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染。
2、引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。
3、检测人员必须通过国家临检中心业务培训并取得合格证书；PCR实验室内工作人员必须参加由国家卫生部或各省临床检验中心举办的临床基因扩增培训班，并持证上岗。
4、PCR实验室布局 PCR实验室原则上为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域并设有专用走廊，各工作区域应设缓冲间，工作区与缓冲间宜安装连锁装置。
5、度或1度，最终停留在某一个较合适的温度完成整个程序。PCR反应中有太多细节要注意了。只能在试验中摸索，进步。现在也有公司可以代做PCR，省时省力，大大缩短研究周期。
6、关机顺序：确认实验已经结束后，首先关闭信号收集软件，然后关掉定量PCR仪主机的电源，最后关闭电脑。 应该定期备份您的实验数据，备份频率推荐每周一次，用光盘刻录。
各位小伙伴们，我刚刚为大家分享了有关pcr扩增中试剂的知识，希望对你们有所帮助。如果您还有其他相关问题需要解决，欢迎随时提出哦！
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