质粒手提试剂配方,质粒提取试剂盒中各溶液配方及作用 -上海生物商贸有限公司

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碱法提取质粒中,基因组dna和蛋白质怎样被去除,其原理何在

1、碱裂解法的原理是：高PH 的溶液会使细胞壁粕类从而使得DNA和蛋白质变性。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。

2、通过离心，可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质，质粒DNA尚在上清中，然后用酚、氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。

3、碱裂解法提取质粒的方法如下：实验原理：碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA 与线性染色体DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。

4、碱裂解法分离提取质粒DNA的基本原理是：（）A.碱性条件下染色体DNA变性，去除变性条件后，可以复性；而质粒DNA则相反。B.碱性条件下质粒DNA变性，去除变性条件后，可以复性；而染色体DNA则相反。

1、电泳检测时的上样液浓度太大，导致的DNA无法进入胶体中。通常是loading buffer中水分挥发掉了浓度太大，点样的时候会被枪头带出来，或者就是浓度大使得DNA无法进入琼脂糖凝胶，换loading buffer，或者加水。

2、质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体（或拟核）以外的DNA分子，在提取的质粒测浓度300多的情况下，跑胶没有条带的原因是蛋白之类的没有裂解干净，导致吸光值很高。

3、而对于测od值来说，我们关注的是其吸光度，吸光度这与rna中的碱基有关，与分子结构无关，所以当然能测出值来。并且，降解和片段化的程度越高，暴露出的碱基愈多，吸光度也越大，测出的值当然也越高，这是不矛盾的。

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