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4kd的蛋白用什么预制胶「蛋白预制胶供应商」

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关于小分子蛋白的Western-blot问题,实验时的胶浓度,电压,转膜条件等等...

。当然是胶的浓度。9kda的话要适当增大,15-20%应该差不多吧。如果实在不行还能考虑用gradient gel。2。二是转膜缓冲液,内要含20%甲醇,新鲜配制,反复使用的话注意甲醇会蒸发掉。如果连续使用的话两三次应该还可以。

 4kd的蛋白用什么预制胶「蛋白预制胶供应商」-图1

对于大分子量(100kd)蛋白而言,一般不用考虑过转情况,看条带对应的marker是否转上,即可确定自己的条带是否转上。如果没有,适当增加电压/电流,延长时间,还有避免胶和膜中间有气泡。

一般浓缩胶为80V,这样可以达到较好的浓缩效果,当条带达到分离胶时,可以调到220V,这样时间快点,做Wb时蛋白降解较少。

在Westernblot发光检测中常见的问题之一就是目的蛋白信号弱或无。

蛋白质电泳制胶要注意哪些方面

1、蛋白负载量:确定合适的蛋白负载量以避免凝胶电泳过程中的扩散和模糊。根据实验目的和样品特性,进行适当的优化。电泳条件:选择适当的电泳条件,如电流强度、电压、电泳时间和缓冲液pH值等。

 4kd的蛋白用什么预制胶「蛋白预制胶供应商」-图2

2、(2)安装电泳槽和镶有长、短玻璃板的硅橡胶框时,位置要端正,均匀用力旋紧固定螺丝,以免缓冲液渗漏。样品槽板梳齿应平整光滑。(3)在不连续电泳体系中,预电泳只能在分离胶乡合后进行。洗净胶面后才能制备浓缩胶。

3、.有的蛋白质(如:电荷异常或结构异常的蛋白质;带有较大辅基的蛋白质)不能采用该法测相对分子量。5.如果该电泳中出现拖尾、染色带的背景不清晰等现象,可能是SDS不纯引起。

4、工件要有工艺孔,防止串槽及内腔无漆膜;要注意杀菌;控制工艺参数。

10kd蛋白用多大浓度的胶

1、KD大小蛋白使用14%-20%胶比较适合。我所用bio-rad器具可以用100-200V电压。电压一般根据电泳槽厂商的推荐来设置。

 4kd的蛋白用什么预制胶「蛋白预制胶供应商」-图3

2、一般测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶;测定20kDa分子量以下的蛋白可选择15%浓度的分离胶,中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。

3、如果说是分子量较大的蛋白(60KD以上),可以用10%的胶,分子量在60~30KD之间的可以用12%的胶,低于30KD的我一般都是用15%的胶了。主要在于指示线刚好跑出胶底的时候,你的目的蛋白能够恰好处于胶的中间部分。

4、不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。

5、我最小也只做过十几KD的。但是根据原理呢主要有以下注意事项:1。当然是胶的浓度。9kda的话要适当增大,15-20%应该差不多吧。如果实在不行还能考虑用gradient gel。2。

6、这个要看你蛋白大小的,个人习惯:蛋白如果100kD以上的话用8%,100-60用10%,60-40用12%,40-10用15%,分子克隆上面有的,每个浓度大概跑什么大小的蛋白质。

蛋白预制胶使用

天地人和品牌的预制胶用的可以,价格实惠也不贵,网页链接这个是天地人和品牌的预制胶可以浏览一下,这个用的真心不错。

-400mA。根据查询相关公开信息显示,12%预制胶通常湿转的电流为300-400mA,转膜30-60分钟。,随着时间增加电压会逐步降低,例如从约150-200V降低到100-150V左右。

跑基因组,核酸电泳,用琼脂糖凝胶就可以,琼脂糖直接配0.8-3%这个范围都行,基因组的话,1%就可以。用不上预制胶。

μL。15孔胶是蛋白预制胶,为聚丙烯酰胺电泳凝胶,用于蛋白质分离,单片胶为15孔,每孔最多上样量为30μL,推荐上样量15μL。μl是药物常用的单位。U代表单位,L代表体积升。

%。根据医学知识资料,15%的胶更适合10KD以下的蛋白,10-40KD的蛋白建议使用12%的胶,结果更易出,条带也漂亮。蛋白又可称为蛋白质,其是维持机体正常活动的重要成分。

还是可以接受的。万生昊天生物的EZBiolab-Tricine胶则可以分离小至3kDa的蛋白,同样对于250kDa以上的蛋白就无能为力了,价格相对要便宜一些,每块在100左右。不过Tris-Tricine预制胶的保质期一般都比较短,大概在一个月左右。

分离小分子蛋白的凝胶体系是什么?哪个牌子的预制胶比较适合呢?_百度...

1、一般是Tris-Tricine体系,常见的Bio-Rad的可以分离小至1 kDa的蛋白,不过对于250 kDa以上的蛋白,就无能为力了。

2、进口有Invetrigen, biorad, life和EZBiolab等品牌。Invetrigen质量最好,价格也最贵。life和biorad就一般。上海万生昊天的EZbiolab预制胶质量和invetrigen差不多,价格便宜很多。

3、双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。

4、琼脂糖凝胶孔径较大,对一般蛋白质不起分子筛作用,但适用于分离同工酶及其亚型,大分子核酸等应用较广,介绍如下: ⒈琼脂糖凝胶电泳的原理概述琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D-半乳糖和6-脱水-L-半乳糖。

以上内容就是解答有关4kd的蛋白用什么预制胶的详细内容了,我相信这篇文章可以为您解决一些疑惑,有任何问题欢迎留言反馈,谢谢阅读。

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