朋友们，你们知道xfect转染试剂操作手册这个问题吗？如果不了解该问题的话，小编将详细为你解答，希望对你有所帮助！
悬浮细胞的转染怎么做
提高细胞转染效率，电击对细胞有一定的损伤，最好选用 具有细胞膜修复功能 的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到最低。转染过程中，操作步骤一定要谨慎。
转染步骤如下：试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。
培养基的离子成分。用缓冲盐溶液（如HEPES 盐缓冲液）悬浮细胞，转染效率比用含甘露糖或蔗糖等非离子物质的缓冲液高数倍。细胞的生理状态。生长活跃、状态健康、无污染、最好低代次的细胞可获得最佳转染效果。
细胞转染是将外源DNA、RNA、蛋白质等分子导入到目标细胞中的一种实验操作。以下是常见的细胞转染方法：化学法转染 常用试剂：例如聚合物如聚乙烯亚胺PEI、聚-L-赖氨酸PLL、聚-L-半胱氨酸PLC；阳离子表面活性剂。
在2×10^5/ml悬浮细胞中加入polybrene至6 μg/ml和适量病毒，充分混匀。37℃孵育。或者150g室温离心4小时(选作，部分难转染的细胞系采用此步骤可以提高转染效率)。
小核酸转染试剂细胞毒性极低?
◎极低的细胞毒性：转染细胞死亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响；◎转染细胞范围广，绝大多数悬浮细胞都能获得比较理想的转染结果。
RFect siRNA转染试剂是一种采用新型的动物源性的纳米材料，毒性很低并且拥有非常卓越转染性能的一种小核酸转染试剂。RFect可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA。
细胞转染对初接触细胞实验的科研人员而言，是一道难过的坎儿，细胞转染率低的话，你珍贵的细胞可能就只能扔掉了。
悬浮细胞转染步骤及优化注意事项
1、优化转染条件非常重要，不同的细胞和实验中，建议都进行最佳siRNA浓度和转染试剂浓度优化。若转染试剂的转染效率不佳，可以尝试更换其他转染试剂，不同的转染试剂操作可能会有很大差异，必须严格按照说明书进行实验。
2、(1)一般会选择复苏细胞传代3-4次(汇合率达到90%之前对细胞进行传代，不要长到100%)，从解冻过程中恢复过来可以稳定生长的细胞进行细胞转染，传代次数高(30-40)时，细胞的生长速度和形态会改变。
3、悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用离心法后，加入新培养基后再吹打分散进行传代 贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精，紫外照射30min。
4、37°C培养48-72h，检测基因抑制效果。如果需要，细胞培养4-6h时可以更换培养基，但不是必须。孵育时间的长短，取决于细胞类型、所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最佳孵育时间。
细胞转染的操作方法?
转染试剂的准备① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体 体积：DNA质量)来转染细胞。
将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。将培养皿转入CO2培养箱中培养，第二天转染。
细胞接种：一般做转染前一天接种/铺板（细胞计数大约5*10^4cell/ml），使做转染前细胞密度在30-50%。为了能在使用时有较好的转染效果，第一次使用建议您用24孔板做，每孔2ul转染试剂即可。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。
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