各位访客大家好!今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于直接qpcr试剂盒的问题，于是小编就整理了几个相关介绍的解答，让我们一起看看吧，希望对你有帮助
翊圣生物的荧光定量pcr试剂盒好用吗,就是反转录加PCR二合一那种
PCR扩增过程必须保证扩增产物只有特异的目标产物，为此，首先要保证PCR反应体系达到最优。目前许多公司都有用于实时定量PCR反应的试剂盒，可以方便PCR反应的操作。
此试剂盒中的反转录酶具有 RNase H 活性，可以在 cDNA 合成之后去除 RNA 模版，减少其对后续 PCR 的影响。 本部分实验，我们选用罗氏的 SYBR Green I Master 试剂盒进行基础的绝对定量分析。
单独做荧光定量PCR就够了。反转录PCR只能叫半定量。非常精准的定量方法还是实时荧光定量PCR。通过荧光强度实时监测产物产生量的变化。
qpcr买试剂盒还要设计引物吗
1、一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。
2、要设计。引物设计原则：引物长度：15-30bp，常用21bp左右。弓|物扩增的跨度：以200-500bp为宜，（具体的长度根据实验目的设计）。
3、对于一个 real-time qPCR 而言，首先就是实验材料的处理和料；然后引物设计，这步至关重要，好的引物是实验本身成功的50%；进行实验和数据分析（这一部分单独说明）。
4、引物设计的基本原则 引物长度：15-30bp，常用为20bp左右。引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C 过多易出现非特异条带。
5、Complementarity - Second primer From Input ，即可查看引物能否形成发卡结构。6。满足条件的即可确定为比较好的qPCR引物，发送至公司邮箱合成即可。这只是设计qPCR引物的其中一种方法，大家可以选择自己熟悉的方法进行设计。
qPCR试剂盒可以做普通的PCR吗?
1、一般情况下不需要那定量的PCR产物去跑胶电泳，只有在实验结果出现问题，例如无扩增曲线，NTC有起飞等情况下，才去做普通PCR作为核查问题的依据。
2、不能。qpcr和pcr都是聚合酶链式反应，但是检测的目的并不一样。
3、qpcr和普通的PCR是一样的，需要buffer，dNTP，taq酶，引物，模板，水等 qpcr 试剂盒是将buffer，dNTP，taq酶混在一起，还需要引物和模板。
4、qPCR的扩增产物一般要求比较短，100－250bp左右，RT-PCR的扩增产物要求300bp以上（大概是这么要求的，具体什么范围也不太清楚了）。如果qPCR的扩增产物扩增不特异的，像你图上这种是不建议跑胶半定量的。
5、实时定量的引物设计要求比较高，可以按普通引物设计的方法来做，但是设计时要注意扩增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之间。
各位小伙伴们，我刚刚为大家分享了有关直接qpcr试剂盒的知识，希望对你们有所帮助。如果您还有其他相关问题需要解决，欢迎随时提出哦！
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