哈喽！相信很多朋友都对克隆基因全长试剂盒不太了解吧，所以小编今天就进行详细解释，还有几点拓展内容，希望能给你一定的启发，让我们现在开始吧！
做基因克隆都需要什么试剂盒
CloneTM一步法快速克隆试剂盒，使得PCR产物不经过酶切与连接，利用同源重组原理直接克隆PCR产物于任意线性化载体中。本产品具有如下特点： 省时：只需要30分钟，即可将PCR产物“同源重组”至目标载体上，直接转化。
所需要的试剂有DMEM培养基，FBS血清，Hochest操作液，蔗糖溶液，甘露醇，细胞松弛剂，硫酸镁，氯化钙，离子霉素，A23187，6-DMAP……这些试剂，跟设备比起来都是小钱。
ToneScript cDNA第一链合成试剂盒是专门用于两步法RT-PCR的第一步，含有合成高质量第一链cDNA所需的所有成分，适用于后续的PCR、qPCR以及基因克隆。
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取细菌基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。
(1) T/A克隆 T/A克隆是把PCR片段与一个具有3’-T突出的载体DNA连接起来的方法(图15)。
构建全长cDNA文库哪个试剂盒比较好
1、Clontech推出的两个文库构建试剂盒操作流程都非常的简便、流畅。首先通过SMART技术得到全长的双链cDNA，再通过限制酶Sfi酶切后，可直接连接到文库载体中。操作流程如图2所示。
2、构建cDNA文库要求的RNA量比做RACE和Northern blot的要多，在材料允许的情况下一般的试剂盒均推荐采用纯化总mRNA后进行反转录，这比直接采用总RNA进行反转录而构建的cDNA文库好，虽然后者也并不是不能做。
3、该试剂盒也可以从来构建SMART cDNA 文库于其它自选载体中。SMART RACE cDNA Amplification Kit 结合了SMART cDNA 合成技术和RACE 的方法。该试剂盒优点在于可以构建全长cDNA，无需接头连接，灵敏度强，方法简单。
4、在最近对7个RNA-seq文库制备方法的研究中，大多是先对RNA进行片段化然后进行加接头。有两种方法，不利用随机引物，或者说在SMARTer Ultra Low RNA试剂盒中， 合成具有固定3，5序列的全长cDNA序列。
5、在上文中有详细的技术比较和介绍。 别的使用该方法建库的公司，只能完全使用商业化的试剂盒构建文库，没有做任何改进。且由于进货渠道的原因，试剂盒内的有些试剂他们是买不到的，质量就会大打折扣。
什么是RACE技术?采用RACE技术如何克隆得到基因的cDNA全长序列?
RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术是用于从已知cDNA片段扩增全长基因的方法，它根据已知序列设计基因片段内部特异引物，由该片段向外侧进行PCR扩增得到目的序列。
经典的RACE技术是由Frohman等（1988）发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5＇和3＇端，包括单边PCR和锚定PCR。
楼上说错了。RACE就是在RNA的5‘加上已知序列。这样PCR。
【答案】：是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术。是一种基于mRNA反转录和PCR技术建立起来的、一部分的一直区域为起点，扩增基因转录本的未知区域，从而或得mRNA(cDNA)完整序列的方法。
已知部分基因序列,如何获得全长基因?
用已知的基因保守序列，设计引物试试；一般来说相同物种相同基因的相似性还是比较高的。当然，可以适当调节扩增程序，比如降低退火温度，这时就是引物配对差点儿，还是可以扩增出来的，可以低到30°C。
一般情况下identity100％）就是含有这个基因的生物了。然后根据已知序列的两端序列设计上下游引物让生物公司去合成，拿到引物后，提取该生物的基因组DNA做模板，利用上下游引物做PCR，再对PCR产物进行TA克隆就可以了。
生物信息学方法查找相关物种中的这一转录本的序列，然后根据保守序列设计兼并引物。提取转录这种转录本的细胞中的RNA，在利用引物扩增出CDNA。这样就获得了这样转录本的全长。
这是NCBI的网站，然后在serch中输入你的基因序列号，即可以得到。下载到序列（就是复制和黏贴的过程），然后可以对这断序列进行编辑了。我一般用的DNAstar，我已经上传了附件。
如何根据CDS克隆基因全长
基因做表达实验必须要克隆全长 步骤：1，RNA抽提（同RT）2，逆转录，使用合成的oligo 3，p内参 4，使用根据已知序列设计的上游引物和提供下游引物做PCR，注意设计上游引物是退火温度与下游引物相差不大。
常用的技术是RACE，根据已知的序列用随机引物扩增未知序列。
然后在保守区域设计间并引物，先将保守区域克隆。然后根据保守区域设计基因特异引物，进行5’RACE及3’RACE，分别拿到保守区域两端的片断，然后序列拼接，拼出全长序列后，在基因两端设计一对引物将基因全长CDS克隆。
拿到部分或全长的cDNA序列。2 如果你做的物种做的人不多，既没有测序，又没有公开的EST库，反正是没有一点cDNA信息，那么你可以采取以下几种种策略。
构建基因表达载体，转化大肠杆菌，涂平板，摇菌，提质粒。或者直接化学合成。
到此，以上就是小编对于基因克隆测序的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。
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