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植物DNA的提取方法
植物DNA的CTAB提取法:经典方法。效果较好,污染少。多用于核基因组提取。SDS提取法:较为简易,提取的为全基因组,但有蛋白污染可能。
如:植物DNA的CTAB提取法:1 称取新鲜叶片2-3g,剪碎放入研钵中,在液氮中研磨成粉末。2 将粉末转移到的加有7ml经预热的1 5×CTAB提取缓冲液15ml离心管中,迅速混匀后置于65℃水浴中,温育30min。
NaOH可以用于提取植物DNA,但是一般需要配合其他物质和方法才能实现。
植物组织提取基因组dna 材料 幼嫩叶子。设备 移液器,冷冻高速离心机,台式高速离心机,水浴锅,陶瓷研钵,50ml离心管(有盖)及5ml和5ml离心管,弯成钩状的小玻棒。
将溶液过虑,然后用浓盐法提取并提纯DNA.,4,首先先用果胶酶和纤维素酶让植物的细胞壁去掉 然后在让植物细胞吸水胀破,让细胞器都出来 再通过密度梯度离心的方法分出细胞器 分出线粒体后,将线粒体磨碎,融入水中,过滤。
提取植物DNA常用的方法是CTAB法。原理:CTAB是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。
CTAB法提取DNA的原理、步骤及注意事项
1、CTAB法原理CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。
2、通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
3、[注意事项] 液氮研磨时,小心操作,以免冻伤。 所有操作均需温和,避免剧烈震荡。
植物DNA提取实验,结果od260、od280、od230都很低,但是od260/280和od...
OD260/280比值指260nm和280nm下吸光光度比值。OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=lg(1/trans),其中trans为检测物的透光值。
理论上,纯的RNA情况下:OD260/OD280的值为2,纯的DNA情况下:OD260/OD280的值为OD260反映的是溶液中核酸的浓度,OD280反映的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度。
一般来说OD260代表核酸的吸光度,OD280代表蛋白质的吸光度。OD230来评估样品中是否存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等。
纯度好的DNA或RNA,在pH7-5 下OD260 / OD280的比值应该在0 或5。 纯净的样品比值大于8(DNA)或者0(RNA)。如果比值低于8 或者0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
od260是核酸吸收的最高峰,od280是蛋白吸收的最高峰。当od260/280处于8-0时,核酸的纯度较高。
粗提取植物DNA的实验步骤和原理
1、(1)粗提取原理:在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时,DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA溶解度又增大。
2、DNA提取实验的基本原理是在破碎细胞壁的条件下,使用化学方法和物理方法将DNA从其他细胞组分中分离出来。DNA鉴定流程包括以下步骤:细胞破碎:通过机械破碎、超声波处理或细胞裂解液等方法,将细胞破碎,并释放其中的DNA。
3、原理就是去掉植物细胞壁 细胞膜 质体 线粒体 叶绿体 剩下细胞核了。就是DNA了。
4、原理是一致的。方法不同。1 植物组织 提取基因组DNA 材料 幼嫩叶子。设备 移液器 ,冷冻高速离心机 ,台式高速离心机 ,水浴锅 ,陶瓷 研钵 ,50ml 离心管 (有盖)及5ml和5ml离心管,弯成钩状的小 玻棒 。
5、mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液。取其滤液,DNA溶于滤液中。
植物基因组dna的提取与鉴定(SDS法)实验过程中可造成DNA降解的可能原因...
1、,加入提取液后,若是65度提取,时间太久,有可能造成部分降解。
2、)样品裂解不充分。保持样本量不变的情况适当增加裂解液。使用液氮或匀浆器对样品进行研磨和匀浆,使其充分混匀,适当延长裂解时间;3)提取材料质量不好。
3、短时高温主要是造成DNA的变性,也就是DNA双链解链成为单链,但在温度下降后会恢复为双链形式。DNA在溶液,尤其是水的稀溶液中,会发生自然的降解作用。降解作用速率和温度关系不大,但是反复的冻融会加速DNA的断裂和降解。
4、可能的原因是:DNA真的降解了;最后提取出来的DNA溶液里DNA浓度太低。如果你用RNase处理过了,那么能够说明你的DNA降解的厉害。那最好使用新鲜的组织,-80度保存的组织也好,不要-20度保存的。
如何从植物组织中提取基因组dna
1、主要提一下CTAB法提取植物基因组DNA原理。
2、. 称取2~5g 新鲜菠菜幼嫩组织或小麦黄花苗等植物材料,用自来水、蒸馏水先后冲洗叶面,用滤纸吸干水分备用。叶片称重后剪成1cm 长,置研钵中,经液氮冷冻后研磨成粉末。
3、(一)水稻幼苗或其它禾木科植物基因组DNA提取 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液?, 60?水浴预热。
4、原理上是可以的,但是我们是不会用植物的根提取DNA的。
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