TET发射什么颜色荧光_荧光发射特性-上海生物商贸有限公司

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“转化子”的概念什么???

1、因转化子能在含有抗生素的琼脂糖培养基上形成菌落，而非转化的细胞被杀死。另一个基因（如tet）可以用作重组的质粒载体的标记，因为目标序列插入此基因导致插入失活。

2、转化子（ transformant ）受体细胞经复制分裂后出现了供体性状的子代。感受态 (competence) 细菌能够从周围环境中吸收 DNA 分子进行转化的生理状态。

3、形成转化子：细胞分裂后，一个子细胞为转化子，另一个子细胞为非转化子。

4、(一)转化 transformation概念：受体菌直接吸收了来自供体菌的DNA片段，通过交换，把它组合到自己的基因组中，从而获得供体菌部分遗传性状的现象。转化后的受体菌，称转化子transformantDNA—转化因子。条件：能进行转化的细胞必须是感受态的。

5、但是不管载体的同源DNA片段有多长，也不管用什么受体细胞，转化后，外源DNA片段除了定位整合外，还会出现不同程度的随机整合，这给筛选定位整合的转化子增加了难度，因此，这类载体尚无很好的应用。

1、荧光pcr法是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。也叫实时荧光定量PCR技术。

2、在进行荧光定量 PCR 时，从技术和产品来说，我们往往会有许多选择，尤其是方法的选择，对最终结果的准确性至关重要。荧光定量 PCR 从方法上来说可以分为染料法和探针法两种。

3、荧光定量 PCR 常用的方法是 DNA 结合染料 SYBR GreenⅠ的非特异性方法。 SYBR Green I 是一种结合于所有 dsDNA 双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的荧光染料，可与所有的各种序列的双链 DNA 分子结合。

4、荧光定量PCR　实验步骤： ①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。

CY5激发光波长：646nm左右发射光波长：664nm左右。

紫外：激发片波长 330nm-400nm，发射片波长： 425nm。紫：激发片波长395nm-415nm，发射片波长：455nm。蓝：激发片波长：420nm-485nm，发射片波长：515nm。绿：激发片波长：460nm-550nm，发射片波长：590nm。

可以根据这种荧光素的激发谱线来确定其激发波长，根据其发射谱来确定其发射波长。激发谱：不同波长的光激发荧光素后，荧光强度的变化。发射谱：同一波长的光激发荧光素后，各波长下的荧光强度的变化。一般都取峰值。

抗体标记的话可以自己制作或购买，二抗可标记FITC或rodanmin，这些都是可以的。至于激发和发射波长，一般的普通荧光显微镜不是很严格是蓝色激发绿色，绿色激发红色，紫色激发黄色；要是在confocal上有特定的激发波段，会给出标识。

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