fam标记的探针tm值为什么会升高「探针标记的优缺点」-上海生物商贸有限公司

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荧光探针的化学性质

1、荧光定量PCR所使用的荧光化学制剂可分为两种：荧光探针和荧光染料。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。

2、根据百度文库资料显示：荧光探针与被测物发生化学反应，导致荧光探针的结构发生变化，从而改变其荧光性质，使荧光减弱。

3、荧光探针是指在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其荧光性质（激发和发射波长、强度、寿命、偏振等）可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

4、荧光探针通常由识别位点的分子、发色团或荧光团，以及两者之间的通信机制构成。

5、卟吩在生物化学中的应用：卟吩也被广泛应用于生物化学研究中。由于其特殊的结构和化学性质，卟吩可以与生物大分子如DNA、RNA等相互作用，并用作荧光探针和分子探针。

6、荧光基团的种类通常是已知的，因此可以通过观察探针的化学结构，预测探针分子中可能存在的荧光基团。荧光基团通常具有类似于苯环、萘环、吡啶环等共轭系统，这些共轭系统可以吸收光能，并在激发态下发生内部跃迁，释放出荧光。

引物是用来扩增片段用的，而探针，探针上面有荧光基团，完整时检测不到荧光，与两引物之间的目的基因结合，PCR扩增过程中，探针被切断，可以检测到荧光。

探针和引物的区别：两者的用途不同：引物设计的用途：用于PCR扩增技术。探针设计的用途：用于标记待定的核苷酸片断，用与特异性地、定量地检测核酸的量。

如果你做的事荧光定量PCR，其引物和一般引物在构成上是没有什么区别的，只是要更加注意引物二聚体、PCR产物大小等问题。

他们都是DNA或者RNA，只是用的方法不一样。说的简单些：引物是用来扩增DNA序列，探针用来与特定的DNA片段做分子杂交的第二个问题：微卫星引物是微卫星两端的侧翼序列，是用来扩增微卫星片段的。

1、tm值的名词解释是即解链温度，DNA的变性从开始解链到完全解链，是在一个相当窄的温度内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值50%时的温度称为DNA的解链温度，这一现象和结晶的融解过程类似，又称融解温度。

2、这同一般结晶的熔化现象类似。引起DNA发生“熔解”的温定范围比较窄，只有几度。通常以增色效应达到最大值的一半时的温度叫DNA的熔解温度（或熔点），以符号Tm表示。不同序列的DNA，Tm值不同。

3、Tm值就是DNA熔解温度，指把DNA的双螺旋结构热变性过程中紫外吸收值达到最大值的1/2时的温度。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。

4、导致DNA“融化”的温度范围相对较小，只有几度。通常染色质效应达到最大的温度称为DNA的熔化温度（或熔点），用符号Tm表示。不同的DNA序列具有不同的Tm值。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，呈比例关系。

5、dna的tm值是将DNA加热变性使DNA的双螺旋结构，失去一半时的温度称为该DNA的熔点或溶解温度，用Tm表示。DNA 分子结构中，两条多脱氧核苷酸链围绕一个共同的中心轴盘绕，构成双螺旋结构。

6、解链温度(Tm)是指在双链DNA或RNA分子变性形成分开的单链时光吸收度增加的中点处温度。

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