生工Bradford试剂盒说明书-上海生物商贸有限公司

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(Bradford法)测定蛋白浓度的试剂盒叫什么?

1、通过调整反应温度和反应时间，检测的线性范围可以达到5-2000ug/ml。更低的蛋白浓度可以用增强型BCA试剂盒，检测的线性范围可以达到0.5-20 μg/ml。两种试剂盒折合的单次反应价格差不多。

2、您可以选择博凌科为的BCA蛋白定量试剂盒，我们实验室用的就是，长期使用，效果不错 BCA(BicinChoninic Acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。

3、蛋白质含量测定方法有：凯氏定氮法，双缩脲(Biuret)法，酚试剂法(Lowry)法，考马斯亮蓝（Bradford）法，紫外吸收法，BCA法及杜马斯燃烧法。其中BCA法与Bradford法成为当今实验室最为常用的两种蛋白浓度定量检测方法。

4、是的，先用OD和蛋白质浓度在EXCEL做标准曲线。OD值为X轴，蛋白质浓度为Y，生成曲线，从曲线里得出方程。然后将未知蛋白的OD值代入方程，就能求出未知蛋白的蛋白质浓度。测的吸光值不要太大和太小。否则误差太大。

5、Lowry法测定试剂盒：Folin酚试剂法包括两步反应：第一步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物；第二步是此络合物将Folin试剂还原，产生深蓝色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。

1、双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。

2、硝化时如不容易呈透明溶液，可将定氮瓶放冷后，慢慢加入百分之三十过氧化氢2到3毫升，促使氧化。在整个消化过程中，不要用强火。

3、蛋白质的定量定主要有直接紫外吸收法、Bradford法和Lorry法三种。

4、全谱分析和定量分析可以用于鉴定大量的蛋白质，具体数量取决于使用的分析方法和设备的灵敏度。现代高通量蛋白质组学技术的发展，如MS质谱法，使得同时分析数千到数万个蛋白质成为可能。

1、紫外吸收法是以含有苯环的氨基酸为基础测量的，OD280值，各种蛋白含有的苯环的氨基酸数量不一定，所以只是大致估计。

2、Folin酚法最好，准确度最高；双缩脲法最差，准确度最低；现很少用；考马斯亮蓝G250法介于两者之间。

3、BCA（Bicinchoninc acid procedure，4，4’-二羧-2，2’-二喹啉）法与Lowry法相似，主要差别在碱性溶液中，蛋白质使Cu2+转变Cu+后，进一步以BCA 取代Folin试剂与Cu+结合产生深紫色，在波长562 nm有强的吸收。

一般最常见的是盐析沉淀，就是在蛋白质溶液中加入一定量的硫酸铵，蛋白质便会沉淀下来，不同蛋白沉淀所需要的硫酸铵浓度不一样，通过这个方法也可以对蛋白进行初步的纯化分离。

盐析法——多用于各种蛋白质和酶的分离纯化在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出，这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。

须进一步分离提纯才能得到有一定纯度的样品。常用的纯化方法有：凝胶过滤层析、离子交换纤维素层析、亲和层析等等。有时还需要这几种方法联合使用才能得到较高纯度的蛋白质样品。

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