bca试剂盒操作_bca试剂盒毒性-上海生物商贸有限公司

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bca蛋白定量原理

1、在碱性条件下，BCA 与蛋白质结合时，蛋白质将 Cu2+ 还原为 Cu+，工作试剂由原来的苹果绿色变为紫色复合物。562 nm 下其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。

2、BCA 蛋白定量法是实验室常用的蛋白质定量方法。

3、基本原理：碱性条件下，蛋白将Cu++还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

4、Bicinchoninic acid (BCA )法是近来广为应用的蛋白定量方法。其原理与Lowery法蛋白定量相似，即在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。

5、原理不同 BCA蛋白定量：碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，吸光强度与蛋白浓度成正比。测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

1、紫外吸收法可测定0.1-0.5mg/ml的蛋白质溶液，此操作简便，测定迅速，不消耗样品，低浓度盐类不干扰测定。因此，此法在蛋白质的制备中广泛应用。

2、紫外分光光度法蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值，在一定的范围内，蛋白质溶液的吸光值与其浓度成正比，可作定量测定。

3、蛋白质测定的方法有双缩脲法、凯氏定氮法、紫外吸收法、酚试剂法等。蛋白质测定是指通过物理或化学方法对蛋白质含量进行测定。蛋白质是构成人体细胞和组织的重要成分，人体正常值一般是60～80g/L。

4、方法有以下几种：直接测定UV法。凯氏定氮法。双缩脲法。酚试剂法。紫外吸收法。BCA法。Lowry法。考马斯亮蓝法。Bradford法测定试剂盒。

5、凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%)，因此，通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测定物质中的氮全来自蛋白质)，即：蛋白质含量=含氮量/16%。

6、蛋白质测定的方法有凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、紫外吸收法等。凯氏定氮法。凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。

1、(3) BCA工作液：将试剂A和试剂B先分别摇晃混匀，然后按照50：1的比例配置BCA工作液，之后再充分混匀并在24小时内使用。(4) 蛋白质标准液：可选用牛血清白蛋白（bsa）作为标准蛋白。

2、bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。

3、在碱性条件下，BCA 与蛋白质结合时，蛋白质将 Cu2+ 还原为 Cu+，工作试剂由原来的苹果绿色变为紫色复合物。562 nm 下其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。

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