illumina建库试剂盒（16s建库试剂盒）-上海生物商贸有限公司

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二代测序建库试剂盒可以在不同测序仪用吗

然后再使用测序仪进行测序，因此，测序仪和建库仪通常是配套使用的。

多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同。

有两种方法，不利用随机引物，或者说在SMARTer Ultra Low RNA试剂盒中，合成具有固定3，5序列的全长cDNA序列。全长的cDNA文库(平均2kb)可以通过长距离PCR(LD-PCR)进行扩增。

Analyzer相同，采用稳定的可逆终止法边合成边测序技术。该技术使用4种含有末端阻断基团和不同荧光信号的碱基进行模板互补链的合成，不仅确保了测序的高精确性和高顺序性，而且排除了由重复序列和同聚物导致的测序错误。

一！个！拷贝的DNA片段会结合到Fellowcell的不同位置上，生成完全相同的测序cluster，然后被测序出来，这些相同的序列就是duplicate。这是duplicate的第一个来源，也是主要来源，称为PCR duplicates(PCR重复)。

DNA甲基化（DNA methylation）为DNA化学修饰的一种形式，能够在不改变DNA序列的前提下，改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下，在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5碳位共价键结合一个甲基基团。

DNA甲基化（英语：DNA methylation）为DNA化学修饰的一种形式，能在不改变DNA序列的前提下，改变遗传表现。为外遗传编码（epigenetic code）的一部分，是一种外遗传机制。

DNA甲基化是最早发现的修饰途径之一，存在于所有高等生物中。DNA甲基化能关闭某些基因的活性，去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。DNA甲基化的主要形式：5-甲基胞嘧啶、N6-甲基腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤。

1、首先，RNA-seq是目前我们触手可及、应用最广的基因表达量检测技术；其次，相较之于链非特异性测序，链特异性测序对大多数人来说更复杂，更难以理解。

2、测序周期以人类基因组重测序为例，30x测序深度大约为1周。

3、待测序的DNA片段通过氢键力与第一种oligo配对从而固定在flowcell上。

4、RNA-seq几乎都是双端测序，去除小RNA（数据长度比较短，单端就可以测通）；ChIP-seq 对DNA 进行比对，不存在可变剪切问题，单端数据应该是可以的，一般来说序列长度大于30bp 就可以比较精确度定位到human 基因组了。

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