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正确的菌种管理与保存方法
点击次数:475 发布时间:2017-09-04

保存菌种应定期检查,一般每年检查1—2次,发现染菌变异等现象时,报告科室主任研究处理。
菌种的来源、复壮、使用和鉴定等均应做好详细记录。
试验菌种不得任意带出菌种保存实验室。外单位索取菌种时,应包装严密,妥善保存。

菌种需有专人保管,管理人员应具有较强的责任心,并具有一定的微生物专业知识和技术水平。
菌种应保存在专用冰箱内,保存菌种的冰箱不得放置食品及易挥发性药品。
按期有专人根据操作规程进行传代接种。
 

控制传代次数。
创造适宜的培养条件。
用不同类型的细胞进行传代。
采用有效的保藏方法。
 
菌种的传代
将微生物接种至一新鲜培养基上/内,每萌发一次即为一代——USP
菌种的传代次数(自原始的菌种冻干粉起)不得超过5代——GMP/CP2005
 
菌种检查和复壮
    经过长期保藏和传代的菌种,由于种种原因易发生衰退、变异或死亡,因此各类菌种在保藏期间必须定期检查,发现变异或衰退,应及时给予恢复。
1.定期检查
在一定间隔时间需重新复活、分离、纯化、鉴定再保藏。
检查项目:菌落形态、革兰染色、显微镜下菌体形态、生化特性及血清学检查。
2. 防止菌落的衰退

菌种保藏
菌种保藏方法一般分四个阶段
(1)挑选特征典型的纯菌菌落
(2)能产生孢子或芽孢的微生物应用孢子或芽孢进行保存
(3)选择zui适宜的方法保藏
(4)定期对保藏菌种进行检查
 
常用的保藏方法
琼脂斜面低温保藏法
液体石蜡覆盖保藏法
半固体琼脂保藏法
甘油冷冻管保藏法
保藏芽孢液

 
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